The perbezaan utama antara membran nitroselulosa dan nilon adalah bahawa membran nitroselulosa mempunyai pertalian tinggi untuk pengikatan protein sedangkan membran nilon mempunyai pertalian tinggi untuk pengikatan asid nukleik. Selanjutnya, interaksi hidrofobik dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nitroselulosa sementara interaksi ionik, hidrofobik, dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nilon

Membran nitroselulosa dan nilon adalah dua jenis membran ke mana makromolekul dipindahkan dari gel. Walau bagaimanapun, membran nitroselulosa dapat digunakan untuk mengikat DNA dan RNA juga.

Perkaitan, Biodyne A, Biodyne B, Nitrocellulose, Asid Nukleik, Nilon, Saiz liang, Protein

Apa itu Membran Nitroselulosa

Membran nitroselulosa adalah matriks biasa yang digunakan dalam Western blotting kerana pertalian protein yang tinggi. Walau bagaimanapun, ia dapat digunakan untuk mengesan asid nukleik selain daripada protein dan glikoprotein yang tidak bergerak. Imobilisasi makromolekul berlaku terutamanya melalui interaksi hidrofobik. Ikatan hidrogen juga terbentuk antara kumpulan nitro membran dan rantai sampingan asid amino protein. Imobilisasi protein akan tinggi dalam kepekatan garam tinggi dan metanol rendah.

Gambar 1: Prinsip Blot

Membran nitroselulosa terdapat dalam bentuk 100% nitroselulosa tulen dengan luas permukaan yang tinggi, yang seragam. Pra-ukuran yang ada ialah 0.2 μm dan 0.45 μm. Saiz pori kecil lebih baik untuk mengikat dengan protein kecil (<14 kDa). Kapasiti pengikatan dan pengekalan protein adalah 80-250 μg / cm². Membran pra-pemasangan siap digunakan. Salah satu kelebihan utama membran nitroselulosa adalah latar belakangnya yang sangat rendah kerana mudah tersekat. Membran nitroselulosa yang disokong dapat dilucutkan dan ditolak.

Apa itu Membran Nilon

Membran nilon adalah matriks yang banyak digunakan untuk mengikat asid nukleik. Membran nilon secara mekanikal kuat daripada membran nitroselulosa. Dua jenis utama membran nilon yang digunakan dalam pembuangan adalah Biodyne A dan Biodyne B. Ukuran pori kedua-dua jenis adalah 0.45 μm. Mereka tahan terhadap haba dan pelarut. Juga, mereka tidak akan mengecil, retak atau terkoyak. Kedua-duanya memberikan latar belakang yang rendah daripada membran nitroselulosa.

Gambar 2: Membran Blot Selatan

Persamaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon

Perbezaan Antara Membran Nitroselulosa dan Nilon

Definisi

Membran nitroselulosa merujuk kepada membran melekit yang digunakan untuk melumpuhkan asid nukleik dan protein dalam pembuangan sementara membran nilon merujuk kepada jenis membran dengan kekuatan tinggi dan tahan panas yang digunakan untuk melumpuhkan makromolekul.

Terdiri daripada

Membran nitroselulosa terdiri daripada selulosa nitrat sedangkan membran nilon terdiri daripada nilon Biodyne A dan Biodyne B yang tidak diubah atau bermuatan positif.

Saiz liang

Ukuran pori membran nitroselulosa adalah 0.2 μm dan 0.45 μm sementara ukuran pori membran nilon adalah 0.45 μm.

Kekuatan

Membran nitroselulosa rapuh dan dengan itu tidak boleh digunakan semula sementara membran nilon kuat secara mekanikal.

Kaedah Pemindahan

Pemindahan elektroforetik digunakan terutamanya dalam pemindahan protein ke membran nitroselulosa sementara pemindahan kapilari adalah amalan biasa dengan membran nilon.

Pertalian

Membran nitroselulosa mempunyai pertalian tinggi dengan protein sementara membran nilon mempunyai pertalian tinggi dengan asid nukleik. Membran nitroselulosa juga dapat digunakan untuk asid nukleik.

Meletup

Membran nitroselulosa lebih baik untuk Western blotting manakala membran nilon lebih baik untuk Southern dan Northern Blotting.

Interaksi Mengikat

Interaksi hidrofobik dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nitroselulosa sementara interaksi ionik, hidrofobik, dan elektrostatik mengikat makromolekul ke membran nilon.

Kapasiti Mengikat Protein

Kapasiti pengikatan protein membran nitroselulosa adalah 80-250 μg / cm² sementara kapasiti pengikatan protein membran nilon ialah 150-200 μg / cm².

Kesimpulannya

Membran nitroselulosa adalah selaput rapuh yang digunakan untuk melumpuhkan protein dalam Western blotting sementara membran nilon adalah membran kuat yang digunakan untuk melumpuhkan asid nukleik. Membran nitroselulosa mengikat molekul melalui interaksi hidrofobik manakala membran nilon mengikat molekul melalui interaksi elektrostatik. Oleh itu, perbezaan utama antara membran nitroselulosa dan nilon adalah pertalian.

Rujukan:

1. "Membran Nitroselulosa untuk Blotting Barat | Thermo Fisher Scientific - LK. " Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Terdapat Di Sini2. "Biodyne A Nylon Membran, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Terdapat Di Sini3. "Membran Nilon Biodyne B, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, Terdapat Di Sini

Gambar Kesopanan:

1. "Blot biology" Oleh Gbdivers - Karya sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Commons Wikimedia2. "Membran Southern blot" Oleh Bojan Žunar - Karya sendiri (CC BY-SA 4.0) melalui Wikimedia Commons