The perbezaan utama antara elektroforesis gel dan SDS PAGE ialah elektroforesis gel adalah teknik yang digunakan untuk memisahkan DNA, RNA, dan protein sedangkan SDS PAGE adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan terutamanya untuk memisahkan protein. Secara amnya, SDS PAGE memberikan resolusi yang lebih baik daripada elektroforesis gel biasa.

Gel Elektroforesis dan SDS PAGE adalah teknik dalam bioteknologi yang membantu dalam pemisahan makromolekul berdasarkan cas dan ukuran. Biasanya, elektroforesis gel menggunakan gel gel agarosa untuk pemisahan sementara SDS PAGE menggunakan tikaman gel poliakrilamida.

Kawasan Utama Dilindungi

1. Apa itu Gel Elektroforesis - Definisi, Prosedur, Kepentingan 2. Apa itu SDS PAGE - Definisi, Prosedur, Kepentingan 3. Apakah Persamaan Antara Gel Elektroforesis dan SDS PAGE - Garis Besar Ciri Umum 4. Apakah Perbezaan Antara Gel Elektroforesis dan SDS PAGE - Perbandingan Perbezaan Utama

Syarat Utama: Agarosa, DNA, Elektroforesis Gel, Poliakrilamida, Protein, MUKA SDS

Apa itu Gel Elektroforesis

Elektroforesis gel adalah teknik yang memisahkan serpihan makromolekul seperti DNA, RNA, dan protein berdasarkan ukuran dan casnya. Semasa elektroforesis gel, makromolekul bergerak di bawah pengaruh medan elektrik pada matriks gel, yang mengandungi liang di mana makromolekul bergerak. Elektroforesis gel adalah teknik umum yang menganalisis DNA dari teknik PCR, RFLP, pengklonan, penjujukan DNA atau blotting. Nanopartikel juga boleh dipisahkan dengan elektroforesis gel. Gel tusuk dibuat dari polisakarida yang disebut agarose yang berasal dari rumput laut. Gel agarosa terdiri daripada molekul agarosa rantai panjang yang saling berkaitan sebagai jaring labah-labah. Video 1 menerangkan penyediaan gel agarosa.

Kedua-dua DNA dan RNA mengandungi kumpulan fosfat pada setiap nukleotida monomernya. Oleh itu, mereka mempunyai cas negatif yang sama di seluruh molekul. Lebih-lebih lagi, mereka berpindah ke arah elektrod positif di bawah medan elektrik. Kelajuan penghijrahan bergantung pada ukuran asid nukleik. Molekul yang lebih pendek berpindah lebih cepat melalui liang sementara yang lebih besar memerlukan sedikit masa.

Gambar 1: Jalur DNA pada Gel Agarose

Apa itu SDS PAGE

SDS PAGE (elektroforesis gel natrium dodecyl sulfate-polyacrylamide) adalah teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan molekul bermuatan berdasarkan ukurannya. Dalam proses ini, SDS digunakan untuk mengasingkan protein dengan mendenaturasinya. Oleh kerana SDS adalah bahan pencuci; struktur protein tersier terganggu olehnya, menjadikan protein terlipat turun menjadi molekul linear. Juga, ia melapisi molekul protein linear dengan cas negatif yang seragam. SDS PAGE terdiri daripada dua gel dengan kepekatan yang berbeza. Lapisan atas disebut gel susun tempat sampel dimuat sementara lapisan bawah disebut gel pemecah. Kepekatan poliakrilamida gel susun adalah 3.5-4% (saiz pori besar) dan ia memusatkan protein dalam satu jalur. Kepekatan poliakrilamida dalam gel pelarut adalah 4-20% (ukuran pori kecil) dan ia memisahkan protein berdasarkan ukurannya. Video 2 menunjukkan penyediaan SDS PAGE.

SDS PAGE menyediakan pemisahan protein dengan cepat, membantu analisis seterusnya seperti Western blotting.

Gambar 2: Jalur Protein pada SDS PAGE

Oleh kerana daya penyelesaian SDS PAGE lebih tinggi daripada gel agarose biasa, SDS PAGE membantu memisahkan serpihan DNA kecil dengan ukuran 5-500 bp.

Persamaan Antara Elektroforesis Gel dan SDS PAGE

Perbezaan Antara Elektroforesis Gel dan SDS PAGE

Definisi

Elektroforesis Gel: Teknik yang digunakan untuk memisahkan serpihan makromolekul seperti DNA, RNA, dan protein berdasarkan ukuran dan muatannya

HALAMAN SDS: Teknik analisis yang digunakan untuk memisahkan molekul bermuatan berdasarkan ukurannya

Komposisi

Elektroforesis Gel: Sama dengan keseluruhan gel; terdiri daripada agarosa

HALAMAN SDS: Dua gel dengan kepekatan yang berbeza; terdiri daripada poliakrilamida

Jalankan Konfigurasi

Elektroforesis Gel: Larian mendatar

HALAMAN SDS: Larian menegak

Metodologi Casting

Elektroforesis Gel: Tetapkan kerana ia sejuk

HALAMAN SDS: Ditetapkan oleh tindak balas kimia

Saiz liang

Elektroforesis Gel: Saiz liang tidak seragam; semakin tinggi kepekatan agarosa, semakin kecil ukuran pori

HALAMAN SDS: Saiz liang seragam; nisbah acrylamide kepada bis-acrylamide menentukan ukuran pori

Penumpuan

Elektroforesis Gel: 0.5-2%

HALAMAN SDS: 6-15%

Pemisahan

Elektroforesis Gel: 50-20, 000 bp asid nukleik

HALAMAN SDS: 5-250, 000 protein Da

Syarat

Elektroforesis Gel: Umumnya dijalankan dalam keadaan asli

HALAMAN SDS: Keadaan denaturasi

Persiapan

Elektroforesis Gel: Ringkas

HALAMAN SDS: Proses yang kompleks

Pewarnaan

Elektroforesis Gel: Dengan etidium bromida

HALAMAN SDS: Pewarnaan Coomassie atau pewarnaan perak

Kesimpulannya

Elektroforesis gel adalah teknik analitik yang memisahkan makromolekul seperti DNA, RNA, dan protein berdasarkan ukurannya. SDS PAGE adalah sejenis elektroforesis gel yang digunakan terutamanya untuk memisahkan protein dalam keadaan denaturasi. SDS PAGE mempunyai daya penyelesaian yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan elektroforesis gel biasa. Perbezaan utama antara elektroforesis gel dan SDS PAGE adalah jenis makromolekul yang dipisahkan dan prosedurnya.

Rujukan:

1. "Elektroforesis Gel." Khan Academy, Terdapat Di Sini2. "Elektroforesis Gel SDS Polyacrylamide (SDS-PAGE)." Diamantina Institute, 26 Apr 2017, Terdapat Di Sini

Gambar Kesopanan:

1. "Elektroforesis gel 2" Von Mnolf - Foto diambil di Innsbruck, Austria (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons 2. "Coomassie3" Oleh Yikrazuul - Karya sendiri (CC BY-SA 3.0) melalui Wikimedia Commons